2022年, 第24卷, 第5期 刊出日期:2022-10-20
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肿瘤新抗原肽诱导献血者PBMC特异反应性T细胞*
杨颖, 路丽明, 李勤, 郭忠慧, 杨启修, 张嘉敏, 赵俸涌, 王晨, 朱自严
临床输血与检验. 2022 (5 ):
565-573.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.004
目的 观察异基因献血者来源PBMC(peripheral blood mononuclear cells)是否可被来自于肿瘤患者测序来源的新抗原肽诱导为特异反应性T细胞。方法 取健康献血者新鲜外周血白膜层,分离获得PBMC后,粘附获得单核细胞,同时冻存PBL(peripheral blood lymphocytes)。单核细胞以每三天加入细胞因子GM-CSF和IL-4进行细胞诱导培养,7天后收获成熟DC(dendritic cells),24孔铺板后分别装载16条肿瘤新抗原肽,其中13条为本项目组前期研究所得,5 h后加入4~10倍细胞数量已复苏的PBL共培养,每三天加入IL-2,对照为不加抗原肽(DC/PBL),加入PHA(Phytohemagglutinin,植物血凝素)PBL孔作为阳性对照;第14天、第21天分别再行新抗原肽脉冲刺激,第22天留取上清液用ELISA方法测量IFN-γ浓度,剩余细胞用流式细胞仪分析CD3+ IFN-γ+ /CD8+ IFN-γ+ T细胞占比。结果 发现10/13中的每条多肽至少可诱导3份PBL分化为分泌IFN-γ反应性CD3+ 或CD8+ T细胞,同步ELISA测得上清液中IFN-γ浓度也升高,以上结果具有一定的相关性(CD3+ 或CD8+ T细胞r值分别为0.66、0.58,P<0.05)。结论 我们成功地建立了用来自肿瘤患者的肿瘤新抗原肽诱导健康献血者的PBMC分化为肿瘤新抗原肽特异性的T细胞。
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lncRNAs ABHD11-AS1靶向miR-133a上调EGFR表达促进卵巢癌细胞增殖*
王之丰, 孙昊, 胡电, 金志军, 刘晓军
临床输血与检验. 2022 (5 ):
574-581.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.005
目的 研究lncRNAs ABHD11-AS1在卵巢癌细胞和输卵管上皮细胞中的表达,探究其对卵巢癌细胞增殖的影响和作用机制。方法 Real-time PCR检测细胞中lncRNAs ABHD11-AS1和miR-133a的表达,双荧光素酶实验明确二者之间的调控作用;用NC siRNA、ABHD11-AS1 siRNA以及NC mimic、miR-133a mimic和NC inhibitor、miR-133a inhibitor分别转染细胞,CCK-8检测细胞增殖;Real-time PCR以及Western Blot实验检测细胞中EGFR的表达。结果 结果表明,lncRNAs ABHD11-AS1在TOV-112D和CaVO3卵巢癌细胞系中的表达水平明显高于TEC细胞,且下调lncRNAs ABHD11-AS1可明显抑制卵巢癌细胞的增殖;ABHD11-AS1与miR-133a的表达呈负相关。双荧光素酶结果显示,转染miR-133a mimic和野生型ABHD11-AS1片段的细胞中荧光素酶的活性显著降低;与输卵管上皮细胞相比,miR-133a在卵巢癌细胞系的表达水平更低。转染miR-133a mimic会显著上调上述两种细胞中miR-133a的表达同时还抑制其增殖和EGFR表达。此外,下调miR-133a可明显促进卵巢癌细胞的增殖以及增加EGFR表达。与此相反,下调lncRNAs ABHD11-AS1明显降低EGFR表达。结论 lncRNAs ABHD11-AS1通过调控miR-133a,上调其下游靶基因EGFR的表达从而促进卵巢癌的发生发展。
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毛细管离心术在胎母血型不一致的临床大量FMH综合征的诊断价值*
张源秦, 徐璐, 马怡然, 杨融辉, 郝一文, 程大也, 丛桂敏
临床输血与检验. 2022 (5 ):
582-587.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.006
目的 探讨毛细管离心术对胎母血型不一致的大量FMH综合征高危孕产妇的辅助诊断价值和临床适用性。方法 25例临床高度怀疑发生胎母血型不一致的大量FMH综合征的妊娠中晚期孕产妇,以流式细胞术结果为金标准评价毛细管离心术对临床大量FMH综合征的诊断效能。结果 在出现典型FMH综合征临床表现的25例孕妇中,有15例经流式细胞术证实发生了大量胎母输血,有11例用毛细管离心术成功分离出血型不一致的胎儿红细胞血型。毛细管离心术诊断临床大量FMH综合征的敏感度为73.3%、特异度60%、阳性预测值73.3%、符合率68%。结论 毛细管离心术对胎母血型不一致的大量FMH具有辅助实验诊断价值,因其简便易行可作为遗传学上可能有胎母血型不一致的大量FMH 综合征的辅助诊断实验。
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术中大量输血对颅内占位患儿检验指标及转归影响分析
张慧敏, 郭凯, 王笑欢, 付晓艳, 王孟键, 张帅行, 马曙轩
临床输血与检验. 2022 (5 ):
591-595.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.008
目的 探讨术中大量输血对颅内占位性病变(space occupying lesion, SOL)患儿临床检验指标及转归的影响。方法 选取2021年1月~2021年12月北京儿童医院行开颅占位清除的SOL患儿56例,根据患儿术中红细胞输血量分为大量输血组(n=27)和非大量输血组(n=29),比较两组患儿输血前后相关临床检验指标(血常规、凝血功能、部分生化指标)及转归。结果 与输血前相比,非大量输血组患儿输血后凝血酶原时间(PT)延长,钾(K+ )、钙(Ca2+ )降低,氯(Cl- )、钠(Na+ )、血糖(GLU)升高(P<0.05);大量输血组患儿输血后血小板(PLT)下降,PT延长,纤维蛋白原(FIB)、K+ 、Ca2+ 降低,Cl- 、Na+ 、GLU升高(P<0.05)。和非大量输血组患儿相比,大量输血组ΔPLT、ΔK+ 、ΔNa+ 、ΔGLU、ΔFIB变化幅度更大(P<0.05)。同时,大量输血组患儿重症监护室(intensive care unit, ICU)停留时间和住院天数明显延长;住院期间术中大量输血组患儿术后低钾血症发生率74.1%(20/27)、高钠血症发生率22.2%(6/27)和感染率48.1%(13/27)显著高于非大量输血组患儿27.6%(8/29)、3.4%(1/29)和13.8%(4/29)(P<0.05)。结论 SOL患儿术中大量输血可能影响凝血功能、生化指标及免疫功能。
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直接抗球蛋白试验和总胆红素与白蛋白比值联合检测在ABO新生儿溶血病导致的严重高胆红素血症中的临床意义
段灵, 陈萍, 胡红兵
临床输血与检验. 2022 (5 ):
600-604.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.010
目的 探讨直接抗球蛋白试验(DAT)和总胆红素与白蛋白比值(B/A)联合检测在ABO新生儿溶血病(ABO-HDN)所致严重高胆红素血症中的临床应用。方法 选择2020年6月~2021年12月,在武汉儿童医院住院的确诊为ABO-HDN的患儿,根据峰值总胆红素水平将研究对象分为高危组和低危组,分析DAT、B/A以及联合检测DAT和B/A对ABO-HDN导致的严重高胆红素血症的预测价值。结果 在270例研究对象中,69例DAT阳性,二元Logistic的结果显示,总胆红素峰值(OR 0.970;95% CI 0.962~0.987)、B/A(OR 6.152;95% CI 3.593~10.535)、DAT(±)(OR 0.106;95% CI 0.018~0.646)、DAT(1+)(OR 0.280;95%CI 0.116~0.674)、DAT(2+)(OR 0.152;95% CI 0.049~0.472)与高胆红素血症的严重程度显著独立相关(P均 <0.05),受试者工作特征(ROC)曲线分析DAT、B/A预测ABO-HDN导致的严重高胆红素血症的最佳截值为±和8.84,DAT、B/A以及联合检测DAT和B/A的曲线下面积(AUC)分别为0.621、0.740和0.750。结论 DAT和B/A可作为ABO-HDN高胆红素血症严重程度的预测指标,联合检测DAT和B/A可进一步提高预测价值。
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医疗机构输血从业人员心理健康状况调查研究*
李志强, 李兴龙, 李丽玮, 于建
临床输血与检验. 2022 (5 ):
605-609.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.011
目的 研究医疗机构输血从业人员心理健康状况,寻找发生心理健康问题的可能原因以及应对调适心理状态的方法。方法 545名医务人员自愿通过微信扫码进入小程序,填写SCL-90症状自评量表。根据从事专业类型分为输血专业组266名,非输血专业组279名,分析输血专业组与普通人群(中国人常规模式值)的SCL-90症状自评量表总均分和10个维度项因子分,以及与非输血专业组在性别、年龄、医院级别、专业技术职称级别和工作所处地域单因素方面的10个维度项因子分区别。结果 输血专业组人员除人际关系敏感和偏执项因子分与中国人常规模式值相比差异无统计学意义(P>0.05)外,其他各项因子分均显著高于中国人常规模式值,分别比较差异有统计学意义(P<0.05);强迫项总症状指数达到最高(1.94),其次是抑郁项(1.70),且均比非输血专业组高。另外,三级医疗机构输血专业人员心理健康问题比二级及以下医疗机构输血专业人员明显(P<0.05),三级医疗机构内输血专业人员心理健康问题也比非输血专业人员明显(P<0.05)。结论 临床输血从业人员心理健康存在一定问题,应及时进行心理疏导。只有让他们拥有健康的心理,才能从根本上确保临床输血的安全,从而更好地为患者的生命保驾护航。
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多次捐献单采血小板对男性献血者白细胞与血小板相关参数的影响研究*
宋英伟, 卞成蓉, 潘雪, 张晓娟, 冯丽梅, 张宏飞, 宋丽娟, 汪德清
临床输血与检验. 2022 (5 ):
610-614.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.012
目的 分析不同献血总次数的男性单采血小板献血者血常规中血小板与白细胞相关指标的变化,评估献血次数对献血者外周血液学相关指标的影响。方法 选择2020年4月23日~2021年4月23日在本中心成功捐献单采血小板且献血总次数分别为初次、十的整数倍次及百次以上的448名男性自愿无偿献血者,其中十次以上的献血者年献血次数≥8次,比较献血者末次单采前外周血中PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT、WBC、NEUT#、LYMPH#、MONO#、EO#和BASO#指标的变化。结果 总献血次数百次以上男性单采血小板献血者的WBC、PLT、PCT、NEUT#和LYMPH#相较于初次男性单采血小板献血者差异有统计学意义(P<0.01),其中WBC、PCT、NEUT#虽差异有统计学意义,但两组献血者三项指标中位数仍在正常参考值范围内,PLT则在可捐献单采血小板血液检查要求(≥150×109 /L且<450×109 /L)范围内。百次以上男性单采血小板献血者LYMPH#低于正常参考值发生率为86.21%,初次男性单采血小板献血者LYMPH#低于正常参考值发生率为6.37%,差异有统计学意义(P<0.01);献血次数越多的单采血小板献血者,LYMPH#水平整体显著更低;献血次数为20、30次的单采血小板献血者中LYMPH#低于正常参考值者高达46.38%,且随着献血次数的增多,LYMPH#低于正常参考值者占比逐步增高。结论 多次数捐献单采血小板会导致献血者LYMPH#水平低于正常参考值,采供血机构在单采血小板献血者招募工作中应重视该现象。
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肝素结合蛋白在鉴别诊断类风湿性关节炎合并细菌感染患者中的临床价值*
宋波, 黄猛, 丰新倩, 任守凤, 张树超
临床输血与检验. 2022 (5 ):
615-620.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.013
目的 探讨血浆肝素结合蛋白(HBP)在类风湿性关节炎(RA)合并细菌感染患者中的诊断价值和临床意义。方法 纳入RA患者122例、单纯细菌感染患者23例、同期健康体检者60例作为研究对象,其中RA合并细菌感染组42例,RA活动期组39例,RA缓解期组41例。应用透射免疫比浊法测定研究对象静脉血HBP浓度,评估其与白细胞(WBC)、红细胞沉降速率(ESR)、C反应蛋白(CRP)的相关性。不同组间比较采用Kruskal-Wallis H检验,使用Spearman做连续变量相关性分析,绘制受试者工作特征曲线(ROC),评估HBP鉴别诊断RA患者合并细菌感染的敏感性和特异性。结果 RA合并细菌感染组HBP为63.30(36.83~123.00)ng/mL,高于RA活动期组17.00(14.00~21.60)ng/mL(P<0.01),高于RA缓解期组8.30(6.65~9.60)ng/mL(P<0.01)和健康对照组7.40(5.63~8.80)ng/mL(P<0.01),与单纯细菌感染组68.70(42.10~100.60)ng/mL比较差异无统计学意义(P>0.05);RA活动期组高于RA缓解期组(P<0.01)和健康对照组(P<0.01);RA缓解期组和健康对照组无统计学差异(P>0.05)。RA合并细菌感染组HBP水平与CRP呈正相关(r=0.332,P<0.05), RA活动期组HBP水平与CRP、疾病活动度(DAS28)呈正相关(r=0.582,P<0.01;r=0.461,P<0.05),两组HBP水平与WBC、ESR均无相关性(P>0.05)。ROC曲线显示当HBP水平为 24.55 ng/mL时,是诊断RA患者合并细菌感染的最佳阈值,其敏感性为92.9%,特异性为84.6%。结论 HBP是可用于RA合并细菌感染和活动期鉴别诊断的敏感且特异的指标。
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血清白介素-10、胸苷激酶1在急性淋巴细胞白血病患儿中的表达及与危险度分层的相关性
宋春艳, 林云碧, 雷庆龄, 吕瑜, 肖祖刚
临床输血与检验. 2022 (5 ):
621-625.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.014
目的 观察血清白介素(IL)-10、胸苷激酶1(TK1)在急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿中的表达情况,并分析二者与ALL患儿危险度分层的关系。方法 选取2018年5月~2021年5月医院收治的100例ALL患儿作为研究对象,全部患儿均评估危险度分层,并调查患儿基线资料,检测患儿血清IL-10、TK1等实验室指标,分析血清IL-10、TK1在ALL患儿中的表达情况及其与危险度分层的关系。结果 全部患儿均接受危险度分层评估,其中24例标危,50例中危,26例高危,占比分别为24.00%,50.00%,26.00%;3组基线资料对比,差异无统计学意义(P>0.05);高危组的IL-10、TK1及白细胞(WBC)计数均高于标危组和中危组,且组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05);采用Kendall's tau-b相关性分析结果显示,ALL患儿血清IL-10、TK1及WBC计数与危险度分层之间呈正相关(r>0,P<0.05);建立多元Logistic回归分析结果显示,以高危组为参照,血清IL-10、TK1及WBC计数降低时,ALL患儿危险度分层低的可能性分别为7.128倍、13.572倍及1.665倍(P<0.05)。结论 血清IL-10、TK1在ALL患儿中存在异常表达,且与危险度分层存在相关性。
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自身免疫性肝炎患者外周血T淋巴细胞PD-1/PD-L1表达及其与肝功能指标的相关性
王变, 沙敏, 肖丽, 李阳
临床输血与检验. 2022 (5 ):
626-634.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.015
目的 探讨自身免疫性肝炎患者外周血T淋巴细胞中程序性死亡因子-1(PD-1)和程序性死亡因子配体-1(PD-L1)的表达及其与肝功能指标的相关性。方法 选取2016年1月~2021年7月本院收治的131例自身免疫性肝炎患者(疾病组),另根据配对原则选取同期体检健康者112例(对照组),另取93例临床资料均匹配的肝血管瘤手术患者作为肝血管瘤组。均检测外周血CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞中PD-1、PD-L1表达水平并进行对比。比较疾病组不同病情程度患者T淋巴细胞中PD-1、PD-L1表达情况,比较疾病组、肝血管瘤组、对照组肝功能相关指标[总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)],采用Pearson相关性分析法分析自身免疫性肝炎患者外周血T淋巴细胞中PD-1、PD-L1表达与肝功能相关指标的关系,另比较不同肝功能Child-Pugh分级患者外周血T淋巴细胞中PD-1、PD-L1表达情况。结果 疾病组外周血CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞中的PD-1、PD-L1表达率均明显高于肝血管瘤组与对照组(P<0.05),但肝血管瘤组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);外周血CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞中的PD-1、PD-L1表达率在轻度、中度、重度自身免疫性肝炎患者中逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);疾病组血清TBIL、DBIL、IBIL、ALT、AST、GGT、ALP水平均明显高于肝血管瘤组与对照组(P<0.05),TP、ALB水平低于肝血管瘤组与对照组(P<0.05);肝血管瘤组肝功能相关指标水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);经Pearson相关性分析,疾病组患者外周血CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞中的PD-1、PD-L1表达率与TBIL、DBIL、IBIL、ALT、AST、GGT、ALP水平均呈明显正相关(P<0.05),与TP、ALB水平呈负相关性(P<0.05);外周血CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞中PD-1、PD-L1表达率在自身免疫性肝炎患者肝功能Child-Pugh分级A、B、C级中依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 自身免疫性肝炎患者外周血T淋巴细胞中PD-1、PD-L1呈现高表达,且与病情严重程度、肝功能密切相关,此对临床诊疗具有重要指导价值。
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血糖控制达标的2型糖尿病视网膜病变患者外周血miR-3197、miR-2116-5p的表达水平及其临床价值*
张浩, 方新梅, 张玛丽
临床输血与检验. 2022 (5 ):
635-642.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.016
目的 探究糖尿病性视网膜病变(DR)相关标志物,分析循环miR-3197、miR-2116-5p在血糖控制达标的2型糖尿病视网膜病变患者中的表达及其临床价值。方法 选取2018年7月~2020年3月在我院确诊为DR的2型糖尿病(T2DM)患者72例作为研究对象,并选择同期未有DR的T2DM患者72例作为对照组。对比两组患者的一般资料,通过μParaflo™ MicroRNA微阵列法检测两组患者miRNA的表达水平,并采用逆转录定量PCR(RT-qPCR)技术进行验证。通过Spearman法和Pearson法分析DR患者血清miR-3197和miR-2116-5p水平与DR及各血液指标的相关性,并利用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析循环miR-3197和miR-2116-5p单项检测以及两项联合检测诊断DR的敏感性和特异性,评估其诊断价值。结果 DR组患者的GA、FPG、UACR以及HbA1c指标高于非DR组,差异具有统计学意义(P<0.05),两组患者在年龄、BMI、糖尿病病程、TC、Cr、HDL、LDL、TG以及BUN方面没有显著的组间差异(P>0.05)。μParaflo™ MicroRNA微阵列检测到73种miRNA在DR病例中差异表达,其中miR-3197和miR-2116-5p在DR患者中的含量显著高于非DR患者,且与RT-qPCR分析验证结果一致。DR组患者血清miR-3197和miR-2116-5p水平分别与DR、GA、FPG、UACR以及HbA1c 呈正相关(均为P<0.001)。通过ROC曲线评估循环miR-3197和miR-2116-5p对DR的诊断敏感性和特异性,miR-3197和miR-2116-5p的AUC分别为0.903和0.875,miR-3197和miR-2116-5p联合检测的AUC为0.976,显著大于单项检测。结论 循环miR-3197和miR-2116-5p在DR患者中显著上调,与DR病情严重程度及多种DR相关指标密切相关,可能参与疾病的发生发展,二者联合检测对DR有更高的诊断价值,提示miR-3197和miR-2116-5p联合检测可能在临床诊疗中具有一定的应用前景。
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B等位基因新突变导致B抗原弱表达1例*
李小薇, 李慧敏, 宁义平, 白晓莹, 李翠莹
临床输血与检验. 2022 (5 ):
643-646.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.017
目的 研究1例B抗原减弱患者的血清学和基因学特征。方法 采用盐水法和微柱凝集法等血清学方法进行患者ABO血型检测;采用PCR技术特异性扩增ABO基因第1~7外显子,PCR产物纯化后进行Sanger测序分析并确定突变位点的位置。结果 患者血清学方法表现为红细胞B抗原弱表达,同时血清中存在抗-A抗体,无抗-B抗体。PCR-SSP技术基因分型结果为ABO*B.01/ABO*O.01.01型,测序结果显示在其第7外显子上的第448位碱基发生了T>C的杂合突变,进一步进行单链测序证明该突变点位于B基因上,属于新的未被NCBI和dbRBC数据库收录的B等位基因。结论 B等位基因新突变是造成ABO*B.01/ABO*O.01.01基因型中B抗原弱表达的原因之一,血清学和基因学联合应用有助于发现血型表现型和基因型特点,为制定临床输血策略提供参考。
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B(A)血型的血清学特点及基因分析-附1例报告
何子毅, 胡应明, 崔四平, 许先国
临床输血与检验. 2022 (5 ):
651-653.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.019
目的 分析B(A)血型的血型血清学及分子生物学鉴定特征。方法 采用血型血清学方法鉴定ABO血型表型,基因测序法鉴定ABO血型基因型。结果 血型血清学鉴定ABO血型正反定型不一致,正定型A抗原弱凝集,B抗原强凝集,H抗原凝集强度与正常Oc相同,反定型检出弱抗-A1,考虑A2 B或A亚 B型;ABO基因第6、7外显子进行正反直接基因测序,第6外显子有ABO*O.01.02等位基因,第7外显子存在独特的单碱基c.700C>G变异,可导致p.Pro234Ala改变,证实该患者基因型为ABO*BA.02,血清学表型为B(A)型。结论 血型血清学鉴定为A2 B型或A亚 B时应进一步采用分子生物学分型确定是否为B(A)型,本例经基因测序分型鉴定为罕见的B(A)/O 02,基因型为ABO*BA.02/O.01.02。
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低氧环境下VEGF及其受体的造血调控作用及机制研究进展*
李治材, 肖军, 李翠莹
临床输血与检验. 2022 (5 ):
676-680.
DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2022.05.023
血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)属于血小板衍生的生长因子超家族,低氧是调节其生成的重要因素之一,通过调节其表达,进而影响造血过程。VEGF与造血的关系逐渐得到证实,主要通过内分泌或旁分泌途径而发挥调节作用。关于VEGF及其受体的认识多与血管形成有关,但VEGF及其受体在胚胎和成人造血以及造血重建等方面发挥着更加重要的作用。VEGFR-1、VEGFR-2在造血细胞发育过程不同阶段的表达对造血细胞的增殖、分化、迁移有着重要的影响。此外,VEGF及其受体与恶性血液病和异常造血的发生关系密切,阻断VEGF/VEGFR通路已经成为了治疗这些疾病的重要靶点。本文拟对VEGF及其受体在造血发生、造血细胞发育以及异常造血过程中的作用和机制进行梳理和综述。
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